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Study of plant viruses is essential to address yield loss in crops due to diseases. However, viruses are most often studied in crops while viruses present in wild areas can also have a significant impact if the virus moves from one plot to another according to the different modes of transmission specific to each virus. It is therefore essential to better understand virus behaviour in these non-cultivated areas, and virus adaptation in their environment, through the identification of new virus species, new host plants and study of virus vectors. This will allow to better control disease risks to crops in case of virus transmission to them from wild reservoirs. In this study, prevalence of three plant viruses was examined, i.e. Barley yellow dwarf virus (Luteovirus, Luteoviridae), a new nepovirus (Secoviridae) candidate and a new waikavirus (Secoviridae) candidate three different plant communities (monoculture, pasture and grassland with high ecological value) within the Natural Park of Burdinale Mehaigne (Antheit, Province of Liège, Belgium). Virus prevalence was studied in plant communities as a whole as well as within some specific Poaceae species (Poa trivialis L. and Lolium perenne L.). Virus prevalence was studied using RT-PCR techniques to determine the presence of the virus in plant samples randomly collected from the plots. Co-infections between these three virus species were also analyzed. Bioinformatics analyses were also carried out on nepovirus and waikavirus candidates in order to determine if they represent some new virus species. Results showed a high prevalence (80-90%) of nepoviruses in wild plant communities, while any symptoms were observed. Bioinformatics analyses allowed study phylogeny of different consensus viral sequences established for each plant community. These sequences were then compared with each other but also with reference sequences from NCBI for Nepovirus, Waikavirus and Sequivirus genera (all belonging to Secoviridae family). Bioinformatics study showed that nepovirus is potentially a new virus species similar to Tomato black ring virus and Beet ringspot virus. The waikavirus shows a significant genetic difference with other waikaviruses. A last part of the project was to investigate host range of White clover mosaic virus. This virus, known to only infect Fabaceae plants such as clovers (Trifolium repens L.), was also detected by high throughput sequencing in Lolium perenne L. in a pasture in Héron (Province of Liège). Virus detection by RT-PCR in clovers and ryegrass confirmed sequencing data and allowed to extend host range of this virus species to Poaceae. L'étude des virus des plantes est essentielle pour remédier aux pertes de rendement des cultures dues aux maladies. Cependant, les virus sont le plus souvent étudiés dans les cultures alors que les virus présents dans les zones sauvages peuvent également avoir un impact significatif si le virus se déplace d'une parcelle à une autre selon les différents modes de transmission propres à chaque virus. Il est donc essentiel de mieux comprendre le comportement viral dans ces zones non cultivées et l'adaptation des virus dans leur environnement, par l'identification de nouvelles espèces virales, de nouvelles plantes hôtes et l'étude des vecteurs de virus. Cela permettra de mieux contrôler les risques de maladies pour les cultures en cas de transmission du virus à partir de réservoirs sauvages. Dans cette étude, la prévalence de trois virus végétaux a été examinée, à savoir le Barley yellow dwarf virus (Luteovirus, Luteoviridae), un nouveau nepovirus (Secoviridae) candidat et un nouveau waikavirus (Secoviridae) candidat dans trois communautés végétales différentes (monoculture, pâturage et prairie à haute valeur écologique) dans le Parc naturel Burdinale Mehaigne (Antheit, Province de Liège, Belgique). La prévalence du virus a été étudiée dans l'ensemble des communautés végétales ainsi que dans certaines espèces spécifiques de Poaceae (Poa trivialis L. et Lolium perenne L.). La prévalence du virus a été étudiée à l'aide de techniques de RT-PCR pour déterminer la présence du virus dans des échantillons de plantes prélevés au hasard sur les placettes. Les co-infections entre ces trois espèces de virus ont également été analysées. Des analyses bio-informatiques ont également été effectuées sur des candidats nepovirus et waikavirus afin de déterminer s'ils représentent de nouvelles espèces virales. Les résultats ont montré une prévalence élevée (80-90%) de nepovirus dans les communautés végétales sauvages, alors que des symptômes ont été observés. Les analyses bio-informatiques ont permis d'étudier la phylogénie de différentes séquences virales consensuelles établies pour chaque communauté végétale. Ces séquences ont ensuite été comparées entre elles, mais aussi avec des séquences de référence provenant de NCBI pour les genres Nepovirus, Waikavirus et Sequivirus (tous appartenant à la famille des Secoviridae). Une étude bio-informatique a montré que le nepovirus est potentiellement une nouvelle espèce de virus similaire au Tomato black ring virus et au Beet ringspot virus. Le waikavirus présente une différence génétique significative avec les autres waikavirus. Une dernière partie du projet consistait à étudier la gamme d'hôtes du White clover mosaic virus. Ce virus, connu pour n'infecter que des plantes de Fabaceae telles que le trèfle (Trifolium repens L.), a également été détecté par séquençage à haut débit sur Lolium perenne L. dans un pâturage à Héron (Province de Liège). La détection du virus par RT-PCR sur trèfle et ray-grass a confirmé les données de séquençage et a permis d'étendre la gamme d'hôtes de cette espèce de virus aux Poaceae.
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Exchanges of microorganisms frequently occur between wild and cultivated plant populations, with the natural compartment significantly influencing pathogenic epidemics in crops. Wild populations comprise various plant species from different families, including some invasive species, which can harbour plant viruses. Most of these viruses are asymptomatic in wild plants due to long-term virus-host coevolution but they could be more virulent in crops or in mixed-infection with other viruses. This master thesis explored the diversity and ecology of viruses infecting Asteraceae family, with a specific focus on invasive goldenrods, particularly Solidago canadensis and Solidago gigantea originated from North America and present in Belgium since the 1860s. To achieve this principal objective, the host range of Verbena latent virus (VeLV, Carlavirus, Betaflexiviridae), a virus newly identified as infecting goldenrod, the virus range of goldenrods, the prevalence of four viruses [VeLV, two novel Genomoviridae (GV1 and GV2) and one novel Tombusviridae (TV)] in Belgian goldenrods were investigated through bioinformatics, two-year field surveys and mechanical inoculation. Bioinformatic analyses allowed to discover a putative novel host of VeLV that is the common sneezeweed Helenium autumnale L. (Asteraceae), as well as a putative novel Carlavirus species close to potato virus H isolated from Tetraena mongolica Maxim. (Zygophyllaceae). Data mining of Solidago sp. revealed two new putative partitiviruses (belonging to Alphapartitivirus and Deltapartitivirus genera) in Solidago canadensis and one new alphaendornavirus in S. decurrens. In further analyses, genomes of these putative novel virus species should be annotated and their biology knowledge deepened. During the 2024 survey, the high prevalence of VeLV was confirmed in the site first identified in 2023 as containing VeLV, suggesting that goldenrods could act as a reservoir for this virus. For the three other viruses (GV1, GV2 and TV), following 2023 results, three sites and three subsites were sampled to study viral prevalence. GV1 and GV2, a priori identified as belonging to Gemycircularvirus genus presented different patterns of distribution within and among sites suggesting a difference of transmission pathways between the two viruses. Moreover, the GV1 did not seem to be present in woody environments and showed contrasted prevalences between sites with large and small populations of goldenrods. This could be related to the sampling frequency or goldenrod density. The novel tombusvirus (TV) was identified in 2023 but not in 2024 in the same site, suggesting its very low prevalence in Solidago population. However, to properly correlate field observations to prevalence patterns of these viruses more fields and plants should be investigated. Mechanical transmission assays conducted for VeLV did not work for any of the tested plants. This observation could be attributed to issues with the inoculation process or with the virus to be mechanically transmitted. To potentially obtain more successful results, alternative transmission methods, such as vector-mediated transmission or other mechanical inoculation using antioxidants, reactivation on the virus on tobacco and optimized environmental conditions could be investigated. To conclude, this master thesis paved the way for understanding the viral diversity in invasive goldenrods and it highlighted the complexity of studying plant viruses within dynamic ecosystems. Finally, this research outlined pathways for further analyses to fully understand the impact of invasive species in viral ecology. Des échanges de microorganismes se produisent fréquemment entre les populations de plantes sauvages et cultivées, le compartiment naturel influençant de manière significative les épidémies dans les cultures. Les populations sauvages comprennent diverses espèces de plantes provenant de différentes familles, y compris des espèces invasives, pouvant porter un ensemble de virus. La plupart de ces virus sont asymptomatiques chez les plantes sauvages en raison de la coévolution à long terme entre le virus et l'hôte, mais ils pourraient être plus virulents dans les cultures ou lors d'infections mixtes avec d'autres virus. Ce Travail de Fin d’Etudes a exploré la diversité et l'écologie des virus infectant la famille des Asteraceae, en se concentrant spécifiquement sur les solidages invasifs, en particulier Solidago canadensis et Solidago gigantea, originaires d'Amérique du Nord et présents en Belgique depuis les années 1860. Pour atteindre cet objectif principal, la gamme d'hôtes du Verbena latent virus (VeLV, Carlavirus, Betaflexiviridae), un virus nouvellement identifié comme infectant le solidage, la gamme de virus du solidage, la prévalence de quatre virus [VeLV, deux nouveaux Genomoviridae (GV1 et GV2) et un nouveau Tombusviridae (TV)] dans les solidages belges ont été étudiés par bioinformatique, par des études de terrain sur deux ans et par inoculation mécanique. Les analyses bioinformatiques ont permis de découvrir un nouvel hôte potentiel du VeLV qui est l’hélénie d’automne, Helenium autumnale L. (Asteraceae), ainsi qu'une nouvelle espèce potentielle du genre Carlavirus proche du virus H de la pomme de terre isolée de Tetraena mongolica Maxim. (Zygophyllaceae). L’exploration des données de Solidago sp. a révélé deux nouveaux potentiels partitivirus (appartenant aux genres Alphapartitivirus et Deltapartitivirus) dans Solidago canadensis et un nouvel alphaendornavirus dans S. decurrens. Par la suite, ces nouveaux génomes devraient être annotés et la connaissance biologique de ces potentiels nouveaux virus devrait être approfondie. La haute prévalence du VeLV a été confirmée lors du relevé de 2024 sur le site où il avait d’abord été identifié en 2023 suggérant que le solidage pourrait être un réservoir de ce virus. Pour les trois autres virus (GV1, GV2 et TV), suite aux résultats de 2023, trois sites et trois sous-sites ont été échantillonnés pour étudier leur prévalence. GV1 et GV2, a priori appartenant au genre Gemycircularvirus, ont présenté des schémas de distribution différents entre et au sein des sites, suggérant des voies de transmission distinctes. De plus, GV1 ne semblait pas présent dans les environnements boisés et montrait une prévalence contrastée entre les sites avec grandes et petites populations de solidages. Cela pourrait être lié à la fréquence d'échantillonnage ou à la densité de solidages. Le nouveau tombusvirus (TV) a été identifié en 2023 mais non détecté en 2024 sur le même site, suggérant une prévalence très faible dans les populations de Solidago. Cependant, pour corréler correctement les observations de terrain et la prévalence de ces virus, il est nécessaire d'examiner davantage de champs et de plantes. Les tests de transmission mécanique réalisés pour le VeLV n'ont fonctionné pour aucune des plantes testées. Cette observation pourrait être attribuée à des problèmes liés au processus d'inoculation ou à des difficultés à transmettre le virus mécaniquement. Pour obtenir des résultats plus probants, d'autres méthodes de transmission, telles que la transmission par vecteur ou d'autres inoculations mécaniques utilisant des antioxydants, une réactivation du virus sur tabac et des conditions environnementales optimisées pourraient être étudiées. En conclusion, ce mémoire a posé les bases pour la compréhension de la diversité virale des solidages invasifs et a mis en évidence la complexité de l'étude des phytovirus dans les écosystèmes dynamiques. Enfin, cette recherche a établi les voies pour de futures analyses afin de comprendre pleinement l'impact des espèces invasives sur l'écologie virale.
viral ecology --- invasive species --- Solidago canadensis --- Solidago gigantea --- bioinformatic analyses --- host range --- Verbena latent virus --- virus prevalence --- Genomoviridae --- Tombusviridae --- Sciences du vivant > Agriculture & agronomie --- Sciences du vivant > Biotechnologie
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