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ORF9p est une protéine de tégument du VZV conservée dans tous les alphaherpèsvirus. Elle est essentielle à la réplication virale et est la protéine la plus exprimée durant l’infection du VZV. Des travaux réalisés au laboratoire ont montré qu’ORF9p joue un rôle important dans l’enveloppement secondaire des particules virales. ORF9p est connu pour interagir avec la glycoprotéine gE, qui est également essentielle à la réplication virale. Son rôle dans l’enveloppement secondaire est bien documenté. Elle serait également importante pour la formation des syncitia et pour la propagation du virus de cellule en cellule lors de l’infection. Il est donc probable que l’interaction entre ORF9p et gE soit importante pour l’enveloppement secondaire.

Chez HSV, les acides aminés 165 à 225 de VP22 (homologue d’ORF9p), ainsi qu’un domaine WW ont été identifiés comme importants pour l’interaction avec gE. Sur base des homologies, des mutations ponctuelles (W169F, F181W, F181A, W201F et W169F/W201F) ont été réalisées dans le domaine WW de la protéine ORF9p et des virus mutants ont été générés.

Contrairement aux virus BAC-VZV-ORF9-W169F-V5, BAC-VZV-ORF9-F181W-V5 et BAC-VZV-ORF9-W201F-V5, les virus BAC-VZV-ORF9-F181A-V5 et BAC-VZV-ORF9-W169F/W201F-V5 se sont montrés incompatibles avec la réplication virale. 

L’analyse en co-immunoprécipitation des virus BAC-VZV-ORF9-W169F-V5, BAC-VZV-ORF9-F181W-V5 et BAC-VZV-ORF9-W201F-V5 et leur comparaison avec le virus BAC-VZV-ORF9-V5 exprimant ORF9p non mutée, révèle que l’interaction entre ORF9p et gE n’est pas altérée par les mutations. En revanche, les mutations W169F et W201F semblent affecter la localisation intracellulaire d’ORF9p et gE qui sont moins exprimées au niveau de la membrane plasmique. De manière intéressante, les virus dans lesquels ORF9p révèlent ces mutations présentent un défaut de croissance reflété par une taille plus réduite des foyers d’infection en comparaison de la taille observée avec le virus sauvage.

Ces résultats montrent que les acides aminés W169, F181 et W201 ne sont pas importants pour l’interaction d’ORF9p avec gE. Par contre, W169 et W201 semblent être importants pour la bonne localisation d’ORF9p et gE et pour la croissance du VZV.

VZV, ORF9p, gE --- Sciences du vivant > Biochimie, biophysique & biologie moléculaire