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ULiège (2)


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2022 (1)

2021 (1)

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Dissertation
Thesis, COLLÉGIALITÉ
Authors: --- --- --- ---
Year: 2022 Publisher: Liège Université de Liège (ULiège)

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Abstract

La prise en charge en soins-intensifs vise surtout à lever l’urgence vitale. Cependant, la connaissance du diagnostic permet d’accélérer la prise en charge en évitant des investigations inutiles et des thérapeutiques inadaptées. Ainsi, connaître la cause de la symptomatologie observée revêt une grande importance même dans des unités de soins intensifs. Toutefois, l’identification de l’anomalie génétique causale est parfois complexe. Le séquençage à haut débit, particulièrement le séquençage du génome complet (Whole Genome Sequencing, WGS) s’est positionné aujourd’hui comme la méthode d’exploration de choix en pédiatrie. Malheureusement, les délais d’analyse qui sont actuellement de 6 à 12 mois, sont incompatibles avec les besoins en soins intensifs. Ainsi certains pays ont commencé à mettre en place la réalisation du WGS en circuit court (rapide Whole Genome Sequencing, rWGS) dans l’objectif de rendre le diagnostic pendant que le patient est encore à l’hôpital de sorte à permettre aux médecins traitant d’intégrer le diagnostic dans leur plan de prise en charge. Le présent projet vise à implementer le rWGS en Belgique.


Dissertation
Biological characterisation of a new virus threatening vegetable crops: Physostegia chlorotic mottle virus (PhCMoV)
Authors: --- --- --- --- --- et al.
Year: 2021 Publisher: Liège Université de Liège (ULiège)

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Abstract

Physostegia chlorotic mottle alphanucleorhabdovirus (PhCMoV) was first detected by High-Throughput Sequencing in 2014 in Austria. Subsequent multiple detections of the virus across Europe, together with severe associated symptoms and resulting yield losses on vegetable crops, suggest that this viral pathogen could be an emergent threat. Due to the recent discovery of this virus, very little is known about its biology. This is why this study tried to investigate the biological characteristics of PhCMoV, with the ultimate aim of evaluating the phytosanitary risk it may represent. To do so, trials were conducted to define the impact of PhCMoV on various greenhouse-grown and mechanically inoculated solanaceous hosts. PhCMoV was found to cause a 70% to 93% reduction of marketable yields of tomatoes inoculated at the 3.5-week stage, depending on the cultivar tested. Despite the total yield was sometimes affected, drops in marketable productions were mostly attributable to a downgrading of tomato fruits. Quality disorders on culls mainly resulted from uneven ripening, mottling, and various chlorotic patterns. While PhCMoV infection did not reduce the number of fruits per plant, the average weight of infected tomatoes was up to more than 40% lower than that of virus-free fruits. Overall, PhCMoV infection was also associated with impaired growth, vein clearing and deformation of leaves, irrespective of the host species. Nevertheless, plants may remain asymptomatic, sometimes until fruiting or regrowth development. Remarkably, the plant's developmental stage at the time of inoculation was proven to be of a considerable influence on the impact of the virus. Alongside those bioassays, sequences from tomato plants from diverse locations were subjected to bioinformatic processing and the whole genome of PhCMoV, when detected, was reconstituted. The purity of the isolate used as inoculation source was ensured and phylogenetic analyses suggested a low mutation rate of the virus, as seen for other viruses of this genus transmitted in a persistent propagative manner by their insect vector. Despite the latter is still unknown for PhCMoV, various leafhopper species found in PhCMoV-infected fields were identified by DNA barcoding, and some of them were subjected to a transmission assay. The results encourage further studies to focus on Anaceratagallia lithuanica and Eupteryx atropunctata as potential vectors. The considerable impact of this virus demonstrated in this trial underlines the crucial need for further research on this virus so that appropriate control strategies can be implemented in case of an outbreak of the disease. Le Physostegia chlorotic mottle alphanucleorhabdovirus (PhCMoV) a été détecté pour la première fois par séquençage à haut débit en 2014 en Autriche. Les multiples détections du virus à travers l'Europe dans les années qui ont suivies, ainsi que les graves symptômes associés et les pertes de rendement qui en résultent sur les cultures légumières, suggèrent que ce pathogène viral pourrait représenter une menace émergente. En raison de la découverte récente de ce virus, sa biologie est très peu connue. C'est pourquoi cette étude a tenté de mieux caractériser le PhCMoV, dans le but ultime d'évaluer le risque phytosanitaire qu'il pourrait représenter. Pour ce faire, des essais en serre ont été menés afin de définir l'impact du PhCMoV sur divers cultures hôtes de solanacées inoculées mécaniquement. Il a été constaté que le PhCMoV entraînait des pertes de 70% à 93% du rendement commercialisable de tomates inoculées au stade de 3.5 semaines, selon le cultivar testé. Les chutes de productions commercialisables étaient principalement attribuables à un déclassement des tomates, ainsi qu'à une à éventuelle réduction du rendement total. Alors que l'infection par le PhCMoV n'a pas réduit le nombre de fruits par plante, le poids moyen des tomates infectées était inférieur jusqu'à plus de 40% de celui des fruits exempts du virus. Les défauts de qualité des fruits invendables résultaient principalement d'un mûrissement inégal, de marbrures et de divers motifs chlorotiques. De manière globale, l'infection par PhCMoV était également associée à des anomalies de croissance, à un éclaircissement des nervures et à une déformation des feuilles, quelle que soit l'espèce hôte. Néanmoins, les plantes malades pouvaient rester asymptomatiques, parfois jusqu'à la fructification ou le développement de repousses. Par ailleurs, le stade de développement de la plante au moment de l'inoculation s'est révélé exercer une influence considérable sur l'impact du virus. Parallèlement à ces bio-essais, des séquences de plants de tomates provenant de divers sites ont été soumises à des analyses bio-informatiques et le génome entier du PhCMoV, lorsqu'il a été détecté, a été reconstitué. La pureté de l'isolat utilisé comme source d'inoculation a été assurée et des analyses phylogénétiques ont suggéré un faible taux de mutation du virus, comme observé pour les autres virus de ce genre dont le mode de transmission par vecteur est de type persistant multipliant. Bien que ce vecteur soit toujours inconnu, diverses espèces de cicadelles trouvées dans les champs infectés par le PhCMoV ont été identifiées par codage à barres de l'ADN, et certaines d'entre elles ont été soumises à un test de transmission. Les résultats encouragent les études futures à se concentrer sur Anaceratagallia lithuanica et Eupteryx atropunctata en tant que vecteurs potentiels. L'impact considérable de ce virus, démontré au cours de cet essai, souligne le besoin crucial de poursuivre les recherches sur ce virus, afin de pouvoir mettre en œuvre des stratégies de contrôle appropriées en cas d'épidémie.

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