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Survivin is an anti-apoptotic protein that belongs to the IAPs (Inhibitor of Apoptosis Proteins) family and controls mitosis.
By alternative splicing, the survivin gene generates two variants : survivin 2B and survivin 3. According to the literature, surviving and its isoforms are strongly expressed during foetal development and also in tumor cells, but they are not expressed in healthy tissues except in thymus and placenta. It has been published that the surviving and its variants produce antigens recognized by cytolitic T lymphocytes that could be used in cancer immunotherapy.
The goal of this work was to measure by quantitative RT-PCR the level of expression of surviving and its variants in normal tissues, tumor lines and tumor clinical sample to evaluate the feasibility of an immunotherapy directed against antigens derived from surviving or its variants. Our results show a high level of expression of surviving and its isoforms in normal cells with a high mitotic index, a level of expression that is similar to that observed in tumor cells.
The second part of this work is an attempt to study the methylation of the promoter of the surviving gene. The methylation status of this promoter in healthy and tumor cells is debated in the literature. In order to clarify this point, we quantified transcripts of surviving and its isoforms in B and T lymphocytes before and after treatment with azadeoxycytidin, a demethylating agent. The results obtained did not allow us to conclude if the promoter was methylated or not in these cells La survivine est une protéine anti-apoptotique appartenant à la famille des IAPs (inhibitors of apoptosis proteins) et régulant la mitose. Grâce à un épissage alternatif, le gène de la survivine génère deux autres formes de la survivine : la survivine 2B et la survivine 3. Selon la littérature, la survivine et ses isoformes seraient fortement exprimées au cours du développement fœtal ainsi que dans les cellules des tissus sains. On a publié que la survivine et ses variantes produisent des antigènes reconnus par des lymphocytes T cytolytiques qui pourraient être utilisés en immunothérapie anti-tumorale.
L’objet de ce mémoire est de mesurer par RT-PDR quantitative le niveau d’expression de la survivine et de ses variants au sein des tissus normaux, des lignées tumorales et des échantillons cliniques de tumeurs pour évaluer les danger d’une immunothérapie dirigée contre les antigènes provenant de la survivine et de ses variants. Les résultats de cette étude montrent un haut niveau d’expression de la survivine et de ses isoformes dans les cellules normales à index mitotique élevé, un niveau d’expression qui est souvent comparable à celui des cellules tumorales.
Une seconde partie du mémoire est consacrée à l’étude de la méthylation du promoteur du gène de la survivine. En effet, l’état de méthylation du gène de la survivine dans les cellules saines et les cellules tumorales est controversé dans la littérature. Pour clarifier l’état de méthylation du promoteur, on a quantifié l’abondance des ARNm de la survivine et de ses isoformes dans des lymphocytes B et T avant et après traitement avec un agent déméthylant, l’azadéoxycytidine. Les résultats obtenus ne nous permettent pas de conclure que le promoteur et méthylé ou pas

RNA, Messenger --- Methylation --- Cells

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RNA, MESSENGER --- ENZYMES

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The expression of TGF-β1, -β2, -β3 and the TGF-β type I receptor (TGFβ-RI) mRNA was examined by real time PCR in human endometrium in vivo and in cultured explants. In vivo, the mRNA levels of these four genes are high and varied slightly throughout the menstrual cycle. However, the TGF-β2 mRNA levels increased 4-fold during the perimenstrual phase. In endometrial explants cultured for 24 to 48 hours without any ovarian steroid, the relative amounts of TGF-β1, -β2 and β-RI mRNA increased 5- to 40-fold, whereas TGF-β3 mRNA levels remained stable. The addition of oestradiol and progesterone had no or limited effects on the increase of TGF-β1, -β2 and β-RI mRNA but significantly decreased the expression of TGF-β3 mRNA. These hormones also inhibited the increase of TGF-β2 mRNA in proliferatve endometrium explants cultured for 24 hours L’expression des ARNm des TGF-β1, -β2, -β3 et de leur récepteur de type I (TGFβ-RI) a été étudiée par PCR en temps réel dans l’endomètre humain in vivo et en culture d’explant. In vivo, les taux des ARNm sont élevés et varient peu au cours du cycle, excepté celui du TGF-β2 qui augmente de 4 fois en phase périmenstruelle. Dans des explants d’endomètres cultivés 24 à 48 heures sans stéroïdes ovariens, la quantité d’ARNm des TGF-β1, -β2 et –RI augmente de 5 à 40 fois, alors que celle du TGF-β3 reste stable. L’addition d’œstradiol et de progestérone a peu d’effet sur l’augmentation des ARNm des TGF-β1, -β2 et –RI, alors qu’elle diminue le taux d’ARNm du TGF-β3. Toutefois, ces hormones inhibent aussi l’augmentation de l’ARNm du TGF-β2 dans les explants d’endomètre prolifératifs cultivés pendant 24 heures

RNA, Messenger --- Transforming Growth Factor beta --- Endometrium

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« ARN messager, PCR, dexaméthasone » : trois entités que la Covid-19 a projetées sous les feux de l'actualité. Revenant sur leur découverte, l'auteur divulgue des étapes cruciales dans la compréhension du contrôle de l'expression des gènes. En compagnie de pionniers de cette conquête, il nous conduira sur les traces d'un espion, sur celles de crapauds géants, et dans une base secrète nazie. Nous voyagerons au Mexique et en Papouasie, et serons au Chili lors du Coup d'État. Nous vivrons une nouvelle ruée vers l'or en Californie à l'aube de la biotechnologie où se croisent idéalistes, aventuriers et entrepreneurs. Les anecdotes cocasses ou dramatiques qui jalonnent le récit et révèlent le dessous des cartes animent une saga humaine et scientifique qui a repoussé les limites de la médecine moderne.

Covid-19 --- RNA, Messenger --- Polymerase Chain Reaction --- COVID-19

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Membrane Glycoproteins --- Antigens --- Polymorphism, Genetic --- RNA Splicing --- RNA, Messenger --- genetics