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Une des études moléculaires de l’expression des gènes dans les tumeurs est basée sur l’ARN extrait de prélèvements de tissu congelé. La pluaprt de ces prélèvements sont composés de différents types cellulaires : les cellules tumorales et les cellules non tumorales. Par conséquent, les altérations moléculaires acquises par les cellules tumorales peuvent être masquées par les cellules non tumorales qui peuvent occuper un voulme significativ de la tumeur. Nous avons développé une technique dans laquelle la transcription réverse suivie de la réaction de polymérisation en chaîne (RT-PCR) peut être effectuée sur des lésions microdisséquées à partir de coupes de tumeurs congelées. Cela permet l’analyse moléculaire d’ARN à partir de populations cellulaires histologiquement homogènes. La microdissection s’effectuant sous microscope, les coupes doivent être colorées afin de sélectionner les cellules à analyser. Lors de ce travail, nous avons déterminé parmi trois agents colorant, celui qui donne le meilleur rendement de l’analyse RT-PCR. Nous avons comparé ces rendements lors de l’amplification de deux gènes ubiquistes : le gène de la β-actine et celui de la porphobilinogène déaminase (PBGD). Nous avons observé que parmi tous les prélèvements analysés, l’hématoxyline s’avérait être le meilleur candidat pour l’analyse RT-PCR effectuée à partir de 10 cellules microdisséquées. Ce mémoire a permis de souligner l’importance du chois des colorants lorsqu’on combine l’analyse histologique et génétique

Dissection --- Lasers --- Proliferating Cell Nuclear Antigen