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Killer cells.

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Killer cells --- Natural immunity --- Killer cells. --- Natural immunity.

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Cytotoxicity, Immunologic. --- Killer cells --- Immunology.

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Killer Cells, Natural --- Neoplasms --- immunology

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My work consisted in analysing the frequencies of antitumor CD8 lymphocytes of a melanoma patient who responded to a vaccine made up of Melan-A.A2 and tyrosinase.A2 antigenic peptides. These investigations were carried out using tetramers to analyse specific CD8 lymphocytes directed against antigens of the vaccine, and using MLTC to analyse the other antigens present on the tumor cells. No significant difference between lymphocytes collected before and after vaccination could be found. However the frequency of antitumor CTL others than anti-Melan-A.A2, frequency determined with MLTC, is about 1-350 CD8 lymphocytes. It is probable that this high frequency of anti-Melab-A.A2 CTL of about 1-3.500 lymphocytes CD8 was found using the specific tetramer. Such frequencies of anti-Melan-A.A2 lymphocytes can be observed in melanoma patients and even in healthy individuals. Although the techniques that we used were completely specific, it was impossible to detect, with MLTC or with specific tetramers, amplified T cell clones among the numerous antitumor lymphocytes that were present. We have tried, but without success, to observe an increase in the number of antitumor lymphocytes that carried an activation marker (CD27) or a marker of migration ti the skin (CLA). Finally, many CD8 T cell clones have been obtained from these experiments. Some of them recognize new shared tumor-specific antigens, whose identification is in progress. Le travail entrepris dans ce mémoire consistait à analyser les fréquences des lymphocytes CD8 antitumoraux chez un patient atteint d’un mélanome et ayant répondu à un vaccine constitué des peptides antigéniques Melan-A.A2. Ces investigations ont été réalisées à l’aide de tétramères pour analyser les lymphocytes CD8 spécifiques du vaccin, ainsi que par MLTC afin d’étudier les autres antigènes présents sur les cellules tumorales. A aucun moment, une différence réellement significative entre le nombre de lymphocytes spécifiques issus de prélèvements réalisés avant et après vaccination n’a été mise en évidence. Cependant la fréquence des CTL antitumoraux autres que Melan-A.A2 de 1 sur 3.500 lymphocytes CD8 a été déterminé à l’aide du tétramère spécifique. Une telle fréquence est parfois présente chez des patients atteints d’un mélanome ou même chez des individus sains. Bien que les techniques utilisées soit tout- à fait spécifiques, il est impossible de détecter par MLTC ou analyse à l’aide de tétramères une augmentation d’un ou de plusieurs clones dans la masse énorme des lymphocytes antitumoraux. Nous avons essayé, mais sans succès, de repérer une augmentation de nombre des lymphocytes antitumoraux porteurs d’un marqueur d’activation (CD27) ou d’un marqueur de migration vers la peau (CLA). Enfin, de nombreux clones lymphocytaires T CD8 ont été issus de ces expériences. Certains d’entre eux reconnaissent de nouveaux antigènes tumoraux partagés, antigènes dont l’identification se poursuit.

Killer Cells, Natural --- Melanoma --- Cancer Vaccines