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Les petites protéines GTPases Rab5a et Rab7 sont des régulateurs agissant en tandem de l’endocytose, et de la dégradation de la thyroglobuline iodée. Nous avons étudié l’expression du gène codant l’isoforme Rab5a et Rab7 dans le tissu de quatre nodules autonomes ou chauds, caractérisés par une hyperfixation de l’iode et une synthèse accrue des hormones thyroïdiennes, et dans le tissu périnodulaire mais au repos correspondant. L’étude a également examiné un nodule froid dépourvu d’activité sécrétoire et son tissu périnodulaire normal.
après mise au point de la technique de PCR en temps-réel pur la quantification de l’ADNc de Rab5a et de Rab7, nous concluons que dans le tissu autonome, l’augmentation de l’expression des protéines Rab5a et Rab7 est dû à une régulation positive au niveau de l’expression de l’ARN messager, résultat probable de la stimulation constitutive de ce tissu par le TSH. Par contre, dans le nodule froid, l’expression des protéines ainsi que de l’ARNm de Rab5a et Rab7 ne semble pas varier.
La deuxième partie de ce travail a porté sur l’étude d’un autre régulateur possible de la dégradation de la thyroglobuline iodée dans les lysosomes, la cathepsine D.
Les résultats en « western blot » montrent qu’il y a une augmentation significative aussi bien de l’expression de la forme mature de la protéine que de l’activité enzymatique de cet enzyme dans le tissu hyperactif comparé au tissu mis au repos. La comparaison des résultats obtenues par ces deux méthodes d’investigation montre que dans le nodule autonome, la contenu en protéine est plus important que ne l’est l’activité enzymatique. Après fractionnement subcellulaire, suivi d’une équilibration isopycnique de la fraction MLP en gradient de Percoll®, nous observons que dans les fractions de densités correspondant aux endosomes tardifs, se trouvent une forme mature de la cathepsine D ne possédant pas d’activité. Ce résultat indique la présence dans le tissu hyperfonctionnel d’une maturation prématurée de l’enzyme au niveau d’une compartiment vésiculaire dont le pH serait insuffisant pour révéler l’activité enzymatique.
l’analyse des fractionnements de sept paires de tissus nodulaire et périnodulaire, montre une relocalisation de l’enzyme de la fraction soluble (S) vers la fraction particulaire (MLP). L’enzyme est donc transporté vers le compartiment où son rôle est le plus efficace. Enfin, il existe une corrélation positive entre l’endocytose apicale de la thyroglobuline, et le contenu de la glande en cathepsine D active.

rab5 GTP-Binding Proteins --- Adenoma --- Blotting, Western --- Thyroid Gland

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GTP-binding proteins --- Interferons --- Gene expression regulation --- Virus diseases --- genetics --- immunology

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Signal Transduction --- ras Proteins --- GTP-Binding Proteins --- Blood Platelets --- GTP Phosphohydrolases --- physiology --- physiology --- metabolism --- enzymology --- metabolism

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CD5 Antigens --- GTP-Binding Proteins --- Proto-Oncogene Proteins --- Signal Transduction --- T-Lymphocytes --- Interleukin-7 --- metabolism --- metabolism --- metabolism --- metabolism --- pharmacology

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Catalogues major facts about receptors, G-proteins and effector molecules. Each entry has a common format, using a minimum amount of text, and contains information on the sequence, gene structure, distribution, agonists/antagonists and physiochemical properties of these proteins.

Human biochemistry --- #ABIB:aimm --- #WDIR:vfm2 --- Membrane Proteins. --- Receptors, Cell Surface. --- GTP-Binding Proteins --- G proteins --- Physiology. --- Receptors --- Handbooks, manuals, etc.