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Antigen-antibody reactions. --- Immunopathology.

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Lymphocytes --- Antigen-antibody reactions. --- Reactors.

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Complement fixation. --- Antigen-antibody reactions.

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Les recherches qui sont à la base de ce mémoire s’inscrivent dans le cadre d’un programme d’étude des antigènes présents sur les protéines des virus de l’immunodéficience humaine.
A mon arrivée dans le laboratoire, des anticorps (Ac) monoclonaux dirigés contre la protéine majeure de la capside du VIH-1 avaient déjà permis l’isolement d’un nombre de clones E. coli exprimant des fragments de la P25 sous forme d’une protéine recombinante. Au cours de ce travail, de nouvelles colonies ont été sélectionnées et l’ensemble a finalement permis de couvrir toute la séquence de cette protéine.
Il m’a alors été possible d’utiliser les colonies et les épitopes ainsi définis pour analyser la réponse humorale (Ac) de sujets infectés par le VIH.
Comme l’indique le titre de ce mémoire, le projet était de décomposer les Ac polyclonaux des sérums en fonction des sites antigéniques et si possible, des épitopes qu’ils reconnaissaient.
La difficulté que posait cette étude est celle du « bruit de fond » : dans le système d’expression utilisé, la protéine P25 est produite dans E. coli ; or tous les sérums reconnaissaient des protéines de cette bactérie, le problème est donc de différencier les clones n’exprimant que des protéines d’E. coli.
Dans une première étape, une méthode d’absorption a dû être mise au point.
Ensuite, pour mieux standardiser le procédé et éliminer une partie des protéines d’E. coli, une purification des protéines recombinantes a été réalisée.
Enfin, pour permettre la détection des Ac dirigés contre un épitope donné, nous avons utilisé une technique basée sur l’inhibition de l’attachement de l’Ac monoclonal spécifique.

Antigen-Antibody Reactions --- Medical Laboratory Science

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Immunodiffusion --- Antigen-Antibody Reactions. --- Immunoelectrophoresis. --- Laboratory Manuals.