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Genetic vectors --- Amino acid sequence

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Genetic vectors --- Molecular cloning --- Vecteurs de clonage --- Clonage moléculaire --- Genetic vectors. --- Molecular cloning.

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Viruses. --- Genetic vectors --- Microorganisms --- Mobile genetic elements --- Extrachromosomal DNA

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La neurotensine, neuropeptide de treize acides aminés médie ses effets suite sa liaison spécifique à son récepteur. Il a été démontré qu’elle induit l’activation de la phospholipase C conduisant à l’augmentation de la concentration cytosolique de calcium ainsi que l’activation de la protéine kinase C. Par ailleurs, des études radio-immunologiques ont montré une colocation de la neurotensine avec la dopamine, médiateur des voies dopaminergiques au niveau des neurones des systèmes méso limbiques et nigrostrié. Cette colocation témoigne d’une interaction entre ces deux neurotransmetteurs.
L’équipe de Castel a démontré l’existence de cette interaction in vivo puisque l’injection de neurotensine à proximité des terminaisons dopaminergiques dans le striatum, était suivie de son internalisation, de son transport vers le corps cellulaire et de l’augmentation d’une telle réponse génétique à la stimulation par la neurotensine a conduit cette équipe à proposer un rôle direct pour la neurotensine internalisée, de régulateur de la transcription du gène de la tyrosine hydroxylase.
L’objectif principal de ce mémoire consistait à étudier un éventuel effet de la neurotensine sur la modulation de l’expression de la tyrosine hydroxylase dans un modèle cellulaire exprimant de manière fonctionnelle, le récepteur de la neurotensine.
Dans un premier temps, ces travaux ont permis de montrer une internalisation de la neurotensine par une mécanisme dépendant de la présence du récepteur. Par ailleurs, des expériences de Nothern blot et de Western blot n’ont indiqué aucune augmentation décelable de l’ARN messager ni de la protéine correspondant à la tyrosine hydroxylase, suite à la stimulation du récepteur de la neurotensine. L’absence d’effet de la neurotensine sur l’expression de la tyrosine hydroxylase dans les cellules PC12 transfectées indique la présence du récepteur de la neurotensine, sa stimulation par la peptide, l’apparition de seconds messagers intra cellulaires et l’internalisation ne sont par des événements suffisants pour entraîner une induction de l’expression de la tyrosine hydroxylase. De plus, certaines de nos expériences permettent de mettre en doute un éventuel rôle de la protéine kinase C dans l’augmentation de l’expression génétique de la tyrosine hydroxylase suite à la stimulation du récepteur de la neurotensine.

Tyrosine-3-Monooxygenase --- Genetic Vectors --- Neurotensin --- Medical Laboratory Science

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Gene Therapy --- Gene Transfer Techniques. --- Gene therapy. --- Genetic Vectors --- Genetic transformation. --- Genetic vectors. --- Transformation, Genetic. --- methods. --- therapeutic use.