Choose an application

• Reference Manager
• EndNote
• RefWorks (Direct export to RefWorks)

Een populatie cellen, allemaal van hetzelfde type, lijkt op het eerste gezicht homogeen te zijn. Echter, in werkelijkheid vertonen deze cellen vaak enige mate van heterogeniteit. Wanneer analyses worden uitgevoerd op basis van het gemiddelde gedrag van de cellen binnen deze populatie, kan dit de aanwezigheid van kleine en zeldzame subpopulaties verbergen en daardoor belangrijke biologische informatie missen. Zo kan het ontstaan van kleine subpopulaties aan kankercellen, die een belangrijke bijdrage kunnen hebben in de progressie van kanker of in de reactie van therapeutische interventies, onopgemerkt blijven. Daarom is het interessant deze heterogeniteit te onderzoeken op het niveau van de individuele cel. Hoewel goede technologieën beschikbaar zijn voor het bestuderen van DNA en RNA in individuele cellen, blijft de analyse van cellulaire eiwitten op dit niveau achter. Een cruciale factor die de effectiviteit van deze eiwitanalyses beïnvloedt, is de staalvoorbereiding. Hoewel methoden voor populatie-gebaseerde analyses goed zijn ontwikkeld, blijft het een uitdaging deze methoden te gebruiken voor kleinere staalhoeveelheden. Daarom is het noodzakelijk om deze methoden te integreren op geminiaturiseerde platformen. Microfluïdische platformen zijn hiervoor zeer geschikt vanwege hun vermogen om verschillende stappen in de staalvoorbereiding te integreren. Om de eiwitanalyse van kleine staalhoeveelheden mogelijk te maken, richt deze thesis zich daarom op het ontwikkelen van een microfluïdisch platform voor staalvoorbereiding. Deze thesis onderzoekt de twee hoofdmodules van het microfluïdisch platform: (i) een module voor celisolatie en lysis, en (ii) een module voor staalvoorbereiding. De celisolatie module bestaat uit een rooster van microstructuren voor het robuust isoleren van cellen, waarbij verschillende parameters zoals stroomsnelheid en celconcentratie worden bestudeerd. Cel lysis wordt vervolgens getest onder omstandigheden die compatibel zijn met verdere eiwitanalyse. Daarnaast wordt een methode onderzocht voor het monitoren en laden van eiwitten op het microfluïdisch platform. Toekomstig onderzoek zal verdere optimalisatie van de staalvoorbereiding en integratie van beide modules in één geïntegreerd platform omvatten.