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L' Hymenocardia acida est une plante de la famille des Hymenocardiaceae utilisée en Afrique Centrale pour ses propriétés anti-diarrhéiques .Des analyses phytochimiques d'un échantillon de l'écorce du tronc ont révélé la présence de composés polyphénoliques; principalement des proanthocyanidols et aussi des saponines.Dans ce travail est développée une méthode d'analyse par HPLC de ces composés. Une préparation de l'échantillon s'est révélée nécessaire: purification par Extrelut® suivi d'un fractionnement sur colonne de Sephadex® LH-20. Dans un premier temps, des méthodes d'analyses basées sur un gradient d'élution, décrites dans la littérature ont été testées sur une de nos fractions. Ne procurant pas de résultats satisfaisants, nous nous sommes alors tournés vers un mode d'élution isocratique et nous avons eu recours à la chimiométrie de façon à optimiser la sélectivité . Les conditions de phase mobile considérées comme optimales sont les suivantes: il s'agit d'un mdange constitué de 9% d'acétonitrile et de 11% de méthanol dans l'eau acidifiée à pH 2,3. Ces conditions expérimentales nous ont permis de détecter 9 composés, correctement séparés et de procéder à une identification par HPLC-MS . Hymenocardia acida is a plant belonging to the Hymenocardiaœae family.It is used in traditional medicine in Central Africa to treat different illnesses including intestinal problems and it has been proven to possess anti-microb.ial properties on several microorganisms including Staphyloccus aureus. Phytochemical analysts of a sample of bark originating from Cameroon md1cated the presence of Polyphenolic compounds, mainly proanthocyanidins, and also saponins.HPLC analysis of the crude extract was very difficult due to the high number of compounds present, so this extract were purified by Extrelut and fractionated on a Sephadex° ill-20 column. One of these fractions contained mainly monomeric, dimeric and trimeric procyanidins. HPLC analysis of this fraction by different methods described in the literature showed the presence of at least 6 peaks but did not provide adequate separation of ail peaks. So we decided to develop a new method . A reversed-phase system was chosen for this study.A conventional chemometrical procedure was used for optimizing the volume fraction of two organic modifiers in the mobile phase, i.e. acetonitrile and methanol.The optimal phase is a ternary mixture constituted of 9 % acetonitrile, 11 % methanol in water acidified at pH 2.3. These experimental conditions allowed us to detect 9 compounds (instead of 6) and to obtain a good separation of ail peaks, which were further identified by HPLC-MS.
Plants, Medicinal --- Diarrhea --- sephadex --- Antidiarrheals
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