Choose an application

• Reference Manager
• EndNote
• RefWorks (Direct export to RefWorks)

The use of hallucinogens is in emergence for a few years. It is according that the laboratory of Toxicology of the Institute of Criminalistic and Criminality decided to develop this method of detection.
The different psychotropic substances and metabolites which integrated the method are 17: cathinone, bufotenine, psilocine, scopolamine, mescaline, ketamine, norketamine, methylphénidate, harmaline, harmine, lobeline, ibogaine, chlorpheniramine, acide ritalinique, kavaïn, 2-oxo-3hydroxy-LSD and LSD.
The choice of the biological type of matrix was directed towards the urine because this one has the advantages of detecting strong concentrations of drugs and allows the detection of a few hours to a few days.
In order to analyze these substances, from which the physicochemical properties are relatively different, the use of the chromatography coupled to mass spectrometer out of tandem (LC-MS/MS) proved like the best choice.
The preparation of the samples was carried out by and extraction in solid phase (SPE) by means of cartridges “mixed mode cation exchange” (MCX) which enabled us to obtain an excellent output whose values oscillate between 76.3% and 105.5%. The reduction of the signal-to-noise ratio, the use of two transitions for each substance (qualifier and quantifier) and the fact of using “deutérés” compounds provided us in correlation with the parameters of times of retention a very high specificity and sensibility.
One of the principal goals of our study was to obtain an extremely low quantification for the LSD. The value obtained for the LOQ of the LSD is 0.00625 ng.
Some low external controls of LSD were added for each analysis; their standard deviations are lower than 10%. The solutions controls containing the LSD are used in routine in the laboratory of Toxicology. At the end of the study, applications on real cases showed that the psilocine, the ketamine and the norketamine can be identified and quantified easily with this method of detection.
Moreover, analysis on plants like the datura (scopolamine) and the peyotl (mescaline) made it possible to identify their hallucinogens. This method could consequently become qualitative for the detection of these psychotropic in the materials of seizure.
In conclusion, the method of detection of hallucinogens offers beautiful prospects for the future because the hallucinogens will be probably drugs of tomorrow. L'utilisation de composés hallucinogènes est en pleine émergence depuis quelques années. C'est dans cette optique que le laboratoire de Toxicologie de l'Institut de Criminalistique et de Criminalité a décidé de développer cette méthode de détection.
Les différentes substances psychotropes et métabolites qui ont intégrées la méthode sont au nombre de 17 : cathinone, bufoténine, psilocine, scopolamine, mescaline, kétamine, norkétamine, méthylphénidate, harmaline, harmine, lobéline, ibogaine, chlorphéniramine, acide ritalinique, kavaïn, 2-oxo-3hydroxy-LSD et LSD.
Le choix du type de matrice biologique s'est orienté vers l'urine car celle-ci présente les avantages de détecter de fortes concentrations de drogues et de réaliser la détection de quelques heures à quelques jours.
Afin d'analyser ces substances, dont les propriétés physico-chimiques sont relativement différentes, l'utilisation de la chromatographie couplée à spectromètre de masse en tandem (LC-MS/MS) s'est avéré comme le meilleur choix.
La préparation des échantillons a été réalisée par une extraction en phase solide (SPE) au moyen de cartouches « mixed mode cation exchange » (MCX) qui nous ont permis d'obtenir un excellent rendement dont les valeurs oscillent entre 76.3% et 105.5%.
La diminution du rapport signal-bruit, l'utilisation de deux transitions pour chaque substance (quantifier et qualifier) et le fait d'utiliser des composés deutérés nous ont fournis en corrélation avec les paramètres des temps de rétention une sensibilité et une spécificité très élevée.
Un des buts principaux de notre étude était d'obtenir une limite de quantification extrêmement basse pour le LSD. La valeur obtenue pour la LOQ du LSD est de 0.00625 ng.
Des contrôles externes faibles en LSD ont été ajoutés lors de chaque analyse, leurs déviations standards sont inférieures à 10%. Les solutions contrôles contenant le LSD sont utilisées en routine dans le laboratoire de toxicologie.
En fin d'étude, des applications sur des cas réels ont démontré que la psilocine, la kétamine et la norkétamine peuvent être identifiées et quantifiées facilement avec cette méthode de détection.
De plus, des analyses sur des plantes comme la datura (scopolamine) et le peyotl (mescaline) ont permis d'identifier leurs hallucinogènes. Cette méthode pourrait dès lors devenir qualitative pour la détection de ces psychotropes dans les matériaux de saisie.
Pour conclure, la méthode de détection d'hallucinogènes offre de belles perspectives pour l'avenir puisque les hallucinogènes seront probablement les drogues de demain.

Hallucinogens --- Urinalysis --- Chromatography, Liquid --- Mass Spectrometry

Choose an application

• Reference Manager
• EndNote
• RefWorks (Direct export to RefWorks)

HIV protease inhibitor and non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors are important antiretroviral drugs which substantially reduced the morbidity and mortality associated with HIV infection. Recent data have shown relationships between plasma concentrations of these two classes of antiretroviral drug and the clinical response. Therefore, in order to maximise the efficiency and to decrease the toxicity of these drugs, therapeutic drug monitoring appears as a valuate tool.
First, we have developed and validated an analytical method using liquid chromatography coupled with electrospray mass spectrometry (LC-MS/MS) for the simultaneous quantification of 7 antiretroviral agents; five protease inhibitors (atazanavir, saquinavir, lopinavir, ritonavir and tipranavir) and two non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors (nevirapine and efavirenz). An analytical run takes 10 minute and the method was validated on a concentration range from 10 to 500 ng/ml. the limits of detection and quantification range from 6.5 to 41.1 ng/ml except for efavirenz and tipranavir, for which these values are somewhat higher.
Second, we tested the implication of the P-glycoprotein (P-gp) in the transmembrane transport of these drugs in order to better understand the great interindividual variations on their pharmacokinetics. This study was performed in two models : in vitro with Caco-2 cells and in vivo in mice deficient for the gene coding for the P-gp. In vitro experiments showed that all tested protease inhibitors are P-gp substrates. Atazanavir seemed to have the greatest functional impact of P-gp genetic polymorphisms. In contrast, non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors do not appear to be P-gp substrates. In vivo results are not very conclusive. In vitro results were confirmed in vivo for nevirapine only.
In conclusion, this work provides a sensitive and rapid method for the simultaneous quantification of seven antiretroviral drugs. It open the way for pharmacogenetic investigations over protease inhibitors and more particularly atazanavir Les inhibiteurs de la protéase et les inhibiteurs non-nucléosides de la transcriptase inverse sont d’importants agents antirétroviraux qui ont fortement diminué la morbidité et la mortalité des patients infectés par le virus de l’immunodéficience humaine (VIH). Il a récemment été démontré qu’il existe une relation entre les concentrations plasmatiques de ces agents et le réponse clinique. Le monitoring thérapeutique est dès lors une pratique potentiellement intéressante pour maximiser l’efficacité et diminuer la toxicité de ces deux classes de médicaments.
Dans un premier temps, nous avons mis au point et validé une méthode de dosage par LC-MS/MS (chromatographie liquide à haute performance couplée à un spectromètre de masse en tandem) pour la quantification simultanée de sept antirétroviraux : cinq inhibiteurs de la protéase (atazanavir, saquinavir, lopinavir, ritonavir et tipranavir) et deux inhibiteurs non-nucléosides de la transcriptase inverse (névirapine et éfavirenz). La méthode, dont le temps d’analyse est de 10 minutes, a été validée sur une gamme d’étalonnage allant de 10 à 500 ng/ml. Les limites de détection et de quantification varient de 6.5 à 41.1 ng/ml, sauf pour l’éfavirenz et le tipranavir pour lesquels les valeurs sont un peu plus élevées.
Dans un deuxième temps, dans le but de mieux comprendre l’origine de la grande variabilité interindividuelle dans la pharmacocinétique de ces substance, nous avons testé l’implication éventuelle de la P-glycoprotéine (P-gp) dans leur transport transmembranaire. Cette étude a été réalisée grâce à deux modèles : le modèle in vitro des cellules Caco-2 et le modèle in vivo des souris KO, déficientes pour le gène de la P-gp. Les expériences in vitro ont montré que tous les inhibiteurs de la protéase testés sont substrats de la P-gp. De manière intéressante, il semble que l’atazanavir possède la plus grande affinité pour la protéine de transport et cette substance pourrait donc être utilisée comme modèle à l’avenir pour la protéine de transport et cette substance pourrait donc être utilisée comme modèle à l’avenir pour vérifier l’impact fonctionnel des polymorphismes génétiques de la P-gp. A l’inverse, les inhibiteurs non-nucléosides de la transcriptase inverse ne semblent pas être des substrats de la P-gp. Les résultats des études in vivo sont peu concluants seuls ceux de la névirapine ont confirmé les résultats déjà obtenus par le modèle in vitro.
En conclusion, ce travail offre la possibilité de doser sept agents antirétroviraux aux cours d’une même analyse et ouvre la porte à des investigations de type pharmacogénétique pour les inhibiteurs de la protéase en général et plus particulièrement pour l’atazanavir

Chromatography, Liquid --- Mass Spectrometry --- P-Glycoprotein --- Anti-Retroviral Agents

Choose an application

• Reference Manager
• EndNote
• RefWorks (Direct export to RefWorks)

The cyclophosphamide is al molecule used in the treatment of many cancers, but is has also immunosuppressant properties and it is an alkylated agent.
It’s metabolised through the liver by the cytochrome P450 2B6. The active metabolite is the phosphoramide mustard. The acrolein is the toxic metabolite and may be responsible for the hemorrhagic cystitis.
In absence of strict precautions, handling of such products by hospital staff may be dangerous for their health. That’s the reason why it’s so important to be able to quantify cyclophosphamide concentration in the urines of those people.
The determination of this substance is done by LC MS/MS. The sensitivity of the assay is 0.05 ng/ml (LOD of 0.05 ng/ml and a LOQ of 0.1 ng/ml)
After 3.50 min, the sample is analysed and the result is given in ng/ml.
Once the determination of cyclophosphamide has been validated, we were able to use the assay in urines from the workers of the pharmacy of St-Luc hospital.
We have also compared our results with those obtained from the reference laboratory (Holland), and we have assessed the preanalytical conditions.
Most of the results were negative (< 0.05 ng/ml) suggesting that the air extraction system and protective measures are efficious La cytophosphamide est une molécule utilisée dans le traitement de nombreux cancers mais elle a également des propriétés immunosuppressives et c’est un agent alkylant.
Elle est métabolisée au niveau du foie par le cytochrome P450 2B6. Le métabolite actif est la moutarde phosphoramide. L’acroléine est un métabolite toxique qui peut être responsable de l’apparition d’une cystite hémorragique.
Une manipulation imprudente, par le personnel hospitalier, de tels produits peut représenter un risque pour leur santé. C’est pourquoi, il est important de pouvoir déterminer avec précision la présence ou non de cyclophosphamide dans les urines de ces personnes.
Le dosage de la cyclophosphamide se fait par LC MS/MS. La sensibilité de cette méthode est de 0.05 ng/ml (LOD de 0.05 ng/ml et une LOQ de 0.1 ng/ml).
L’échantillon est analysé en 3.50 min et le résultat est directement donné en ng/ml. Une fois le dosage de la cyclophosphamide validé, nous avons pu réaliser des dosages sur des urines provenant du personnel de la pharmacie des cliniques universitaires St-Luc.
Nous avons également comparé nos résultats avec ceux du centre international de référence (Hollande) ; ainsi que contrôlé les conditions préanalytiques. La plupart de ces dosages étaient négatifs (<0.05 ng/ml-, ce qui nous autorise à penser que les systèmes d’aération ainsi que les mesures de protection sont efficaces.

Cyclophosphamide --- Urine --- Chromatography, Liquid --- Chromatography, High Pressure Liquid

Choose an application

• Reference Manager
• EndNote
• RefWorks (Direct export to RefWorks)

hplc --- organische verbinding --- vloeistofchromatografie --- Liquid chromatography --- Trace analysis --- Chemistry, Organic --- Chromatography, Liquid --- methods --- Trace elements --- Liquid-liquid partition chromatography --- Chromatographic analysis --- Organic chemistry --- Chemistry --- Analysis --- Chromatography, Liquid - methods

Choose an application

• Reference Manager
• EndNote
• RefWorks (Direct export to RefWorks)

Drugs of abuse consumption is a real daily concern for our societies.
Authorities who penalyze those who drive under the influence of illicit drugs, but also clinical and forensic toxicology, encourage laboratories using an appropriate method for the detection and quantification of these analytes in different biological matrices.
That’s why we developed a method for the simultaneous quantification of amphetamines, opiates, cocaine and metabolites, using a combination of HPLC and tandem mass spectrometry in positive electrospray ionisation. Quantification is performed with Multiple Reaction Monitoring (MRM) transitions of the studied drugs and their deuterated analogues used as internal standards. A validation study was carried-out for plasma, blood and urine. Precision, accuracy, LOD, LOQ, linearity, extraction yield, stability parameters and ion suppression tests were investigated in each biological matrix.
The analytical validation showed results corresponding to our wishes and our method was also tested for vitreous humor. Results showed correlations and discordances between blood levels and those obtained in vitreous humor. Vitreous humor seems to be a good qualitative matrix to be investigated when blood sample is not available. However, for the quantitative aspects, others phenomenons like drug’s instability in blood, or post-mortem redistribution , are contributing to discordance observed between blood and vitreous humor La consommation de stupéfiants constitue actuellement un réel problème de société. Les autorités qui pénalisent ceux qui conduisent sous l’influence de substance illicites, mais aussi la toxicologie clinique et médico-légale, demandent aux laboratoires d’utiliser une méthode appropriée pour la détection et la quantification de ces analytes dans différents milieux biologiques.
C’est pourquoi nous avons développé une méthode pour la quantification simultanée des amphétamines, des opiacés, de la cocaïne et de ses métabolites, utilisant un couplage HPLC et spectrométrie de masse tandem en ionisation par électrospray positive.
La quantification est réalisée via les transitions MRM des substances étudiées et de leurs homologues deutérés utilisés comme standards internes.
Une validation analytique fut réalisée pour le plasma, le sang et l’urine.
La précision, l’exactitude, la LOD, la LOQ, la linéarité, le rendement d’extraction, la stabilité et des tests de suppression d’ions furent investigués dans chaque matrice biologique.
La validation a montré des résultats correspondants à nos espérances et la méthodologie fut appliquée au liquide oculaire. Les résultats ont montré des similitudes et des discordances entre es taux sanguins et ceux obtenus dans l’humeur vitrée.
Le vitré semble être un bon prélèvement qualitatif à investiguer lorsqu’il n’y a pas d’échantillon sanguin disponible.
Cependant, d’un point de vue quantitatif, d’autres phénomènes comme l’instabilité des molécules dans le sang ou la redistribution post-mortem, contribuent certainement à alimenter ces différences observées entre sang et vitré

Narcotics --- Chromatography, Liquid --- Mass Spectrometry --- Amphetamine --- N-Methyl-3,4-methylenedioxyamphetamine