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Recherche de mutations dans le gène de la kétosamine-3-kinase-2, une enzyme impliquée dans la déglycation des protéines

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Fructosamines are the molecules formed by the spontaneous and non-enzymatic reaction of glucose with a primary amine. When this reaction involves the amine function of a protein, the term glycation is used. Fructosamine-3-kinase (also called kétosamine-3-kinase-1) is an enzyme present in mammals that phosphorylates some of the fructosamine residues found in proteins. The fructosamine-3-phosphates formed this way are unstable and spontaneously decomposed in inorganic phosphate and 3-desoxyglucosone, with recovery of the initial amine. Thus, fructosamine-3-kinase is responsible of the deglycation process of proteins. This is also likely to be the case for kétosamine-3-kinase-2 (KN3K2), another mammalian enzyme, sharing 65% identity with fructosamine-3-kinase, able to phosphotylate psicosamines and ribulosamines, but not fructosamines.
The measurement of fructosamine-3-kinase activity in red blood cells of 60 individuals shows a large variability. This variability is in correlation with two polymorphisms found in the sequence of the gene encoding this enzyme. We wanted to see whether the gene encoding ketosamine-3-kinase-2 presents changes in its nucleotidic sequence that could be correlated with differences in enzyme activity.
We searched in the human gene of ketosamine-3-kinase-2 of the same 60 individuals using two different techniques: SSCP analysis and heteroduplex analysis. As a result we could show two nucleotidic changes that modify the encoded amine acids (K187R and V2281).
We expressed in Escherichia coli and purified both, the wild type ketosamine-3-kinase-2 and the two mutations found. In comparison to the wild type protein, we found that that mutated proteins do not show differences with respect to the phosphorylation capacity of lysozyme-allose, the affinity for the ATP, and thermal stability Les fructosamines sont des molécules formées par la condensation spontanée et non-enzymatique du glucose avec une amine primaire. Lorsque cette réaction implique la fonction amine d’une protéine, on utilise la terme de glycation. La fructosamine-3-kinase (encore appelée kétosamine-3-kinase-1) est une enzyme que l’on trouve chez les mammifères et qui phosphoryle certains résidus fructosamines des protéines. Les fructosamines-3-phosphates ainsi formés se détachent des protéines sous forme de phosphate inorganique et de 3-desoxyglucosone, avec restauration de l’amine de départ. La fructosamine-3-kinase est ainsi responsable d’un processus de déglycation de protéines. Il en va vraisemblablement de même pour la kétosamine-3-kinase-2 (KN3K2), autre enzyme que l’on trouve chez les mammifères qui partage 65% d’identités avec la fructosamine-3-kinase, et qui phosphoryle, non des fructosamines, mais des psicosamines et des ribulosamines.
Le dosage de l’activité fructosamine-3-kinase dans les globules rouges de 60 individus montre une grande variabilité interindividuelle. Cette variabilité est en bonne corrélation avec deux polymorphismes qui ont été mis en évidence au niveau du gène codant cette enzyme. Nous avons voulu voir si le gène de la kétosamine-3-kinase-2 présentait aussi des changements au niveau de sa séquence nucléotidique qui pourraient être corrélés avec des différences d’activité.
Nous avons cherché des mutations dans le gène humain de la kétosamine-3-kinase-2 des mêmes 60 individus par deux techniques différentes : l’analyse par SSCP et l’analyse des hétéroduplex. Cette recherche nous a permis de mettre en évidence deux changements au niveau de la séquence nucléotidique qui changent tous les deux les acides aminés encodés (K184R et V228I).
Nous avons exprimé chez Escherichia coli et purifié la kétosamine-3-kinase-2 sauvage et les deux protéines porteuses des mutations trouvées. Comparativement à la protéine sauvage, nous avons vu que les deux protéines mutées ne présentent pas de différences an ce qui concerne la capacité de phosphoryler le lysozymz-allose, l’affinité pour l’ATP et la stabilité thermique

Keywords

Mutation


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La grande mutation : vers une nouvelle société
Authors: ---
Year: 1970 Publisher: Paris : Editions d'Organisation,

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Abstract


Dissertation
Isolement et caractérisation physique de 3 suppresseurs d'une mutation de lyse cellulaire chez Saccharomyces cerevisiae.
Author:
Year: 1987

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Book
Questions de géographie : l'Europe médiane en mutation

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Variations juridiques sur le thème du voyage
Authors: --- --- --- --- --- et al.
ISBN: 9782361701086 2361701081 2379280339 Year: 2017 Publisher: Toulouse : Presses de l’Université Toulouse Capitole,

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Le thème retenu par l'IFR droit « Mutation des normes juridiques » pourrait surprendre car assurément le voyage n'est pas une notion juridique. Mais tout aussi assurément il n'est guère de branches du droit qui ne contiennent de dispositions l'appréhendant. Il serait par ailleurs vraisemblablement vain de chercher une définition universelle et intemporelle du voyage. Pourtant il ne fait aucun doute que depuis ses origines l'histoire de l'humanité n'a cessé d'avoir partie liée avec celle des voyages humains même après la domination des sédentaires sur les nomades. Ces voyages à caractère sacré, commercial, conquérant, savant, initiatique..., ont constitué un défi constamment renouvelé pour le droit des sociétés sédentarisées requis de traduire le délicat équilibre à réaliser entre leur fermeture et leur ouverture à l'inconnu, autrement dit entre une appréhension du voyage et des voyageurs comme une menace pour la préservation de l'ordre social et une appréhension du voyage et des voyageurs comme une promesse du renouveau indispensable de la société. À la faveur de la révolution des transports l'essor du commerce international, l'avènement du voyage de loisirs au XIXe siècle et la massification du tourisme occidental à partir du XXe siècle ont marqué un tournant de l'histoire du voyage et donné naissance à un droit du marché du voyage. Aujourd'hui, alors que toutes les destinations de notre monde semblent connues et que sont menacés de disparition les derniers peuples nomades sous les coups de la globalisation, un fossé se creuse entre le monde des riches néonomades de la mobilité mondiale qui se rient des frontières et le monde des sédentaires ou nomades de misère que les frontières enferment ou menacent. Le défi pour le droit de l'ouverture du monde offerte aux premiers et le défi pour le voyage de la clôture du monde imposée aux seconds invitent à réinventer le voyage et son droit de demain.

Keywords

Law --- mutation --- patrimoine --- voyageur


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Le mécanisme des mutations et la structure du gène
Author:
Year: 1939 Publisher: Paris, Hermann et cie,

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Book
Effets de traitements mutagènes, chimique ou physique, sur des embryons et des cals de riz cultivés in vitro
Authors: --- ---
Year: 1988 Publisher: Louvain-la-Neuve: UCL,

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Article
Destruction du vieux Pékin et polycentralité

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Manuel de l'amélioration des plantes de la grande culture : Méthodes, bases scientifiques, technique.
Author:
Year: 1924 Publisher: Gembloux : Paris : Duculot ; Librairie Agricole,

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Génétique formelle : Méthodes et exercices corrigés
Author:
Year: 2021 Publisher: Paris : Ellipses,

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Abstract

« Cet ouvrage est re´dige´ par un collectif d'enseignants de l'universite´ Clermont Auvergne ayant de nombreuses anne´es d'expe´rience de l'enseignement de la ge´ne´tique formelle de la L1 au master. Cet ouvrage aborde la notion de ge`ne et illustre leur implication dans le de´terminisme des caracte`res. Les principes de leur transmission dans les espe`ces a` reproduction sexue´e sont de´taille´s a` travers des exercices proposant diffe´rents mode`les animaux et ve´ge´taux. L'approche propose´e, issue d'un passe´ scientifique riche, reste actuelle entre autres en agronomie, pour l'e´tude des maladies he´re´ditaires ou en recherche fondamentale. Un rapide historique rappelant le de´veloppement de la ge´ne´tique qui en re´sulte au cours du XXe sie`cle introduit les notions essentielles telles que celles de ge`nes, alle`les, ge´notypes ou phe´notypes, etc. Les me´canismes de la me´iose et la diversite´ ge´ne´tique qui en re´sulte sont de´veloppe´s ainsi que les pre´requis ne´cessaires a` la re´solution d'exercices. Quinze fiches me´thodologiques abordent diffe´rents niveaux de complexite´s d'analyse ge´ne´tique par une pre´sentation des principes et le de´veloppement d'exemples. La dernie`re partie propose 18 exercices de complexite´ variable. La difficulte´ moyenne est indique´e au de´but de chaque exercice permettant un choix rapide en fonction de la situation de chaque e´tudiant. Pour l'essentiel des exercices, les premie`res questions sont abordables et peuvent e^tre re´solues pour certaines de`s le lyce´e. Ce livre s'adresse donc aux e´tudiants de Licence, de Master en biologie, aux e´tudiants qui pre´parent les concours de recrutement de l'enseignement et ceux des classes pre´paratoires aux concours Agro-Ve´to. Les enseignants de ces diffe´rents niveaux, ainsi que ceux exerc¸ant au lyce´e, y trouveront des ide´es de sujets varie´s a` proposer a` leurs e´tudiants.»--Page 4 de la couverture.

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