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Hamilton (Ravalli County, Mont.) --- Stevensville (Mont.) --- Montana --- Stevensville, Mont. --- Hamilton, Mont. --- čłc̓lc̓lé (Mont.)

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L’objectif général de ce travail de fin d’études était d’améliorer la méthode de dosage de trace d’hormones naturelles (E1, E2 et E3) et synthétique (EE2). Cette méthode a été développée par Alex Glineur (2016). Cette méthode de dosage UPLC-MS/MS a tout d’abord été testée sur trois types d’échantillon d’eau soigneusement choisis (eaux de surface et eau souterraine). Les performances de la méthode ainsi que les voies d’amélioration ont été étudiées. L’ajout d’une étape SPE de clean-up ainsi que l’utilisation d’une phase stationnaire alternative (UPLC) ont été déterminés comme axes principaux d’amélioration de la méthode.
L’étude ainsi que la résolution de la problématique importante de la suppression d’ionisation ont également constitué un point important de ce travail. En effet, ce phénomène est observé de manière récurrente sur des échantillons d’eau en MS (/MS) mode electrospray (ESI). L’ajout de la cartouche à caractéristiques polaires Florisil ainsi que l’utilisation de la colonne chromatographique Biphényl ont permis de supprimer drastiquement l’effet de suppression d’ionisation tout en garantissant des rendements acceptables. La séparation de l’éluat de la cartouche Florisil en deux fractions (E1+E2+EE2 et E3) s’est avérée essentielle pour associer rendement important et limitation remarquable de la suppression d’ionisation.
La méthode présentée par Alex Glineur ne permettait pas encore d’identifier et quantifier l’17-α ethynylestradiol à la valeur de LOQ recommandée par la Commission Européenne dans des eaux (suspectées) d’être contaminées (proche de 0,1 ng/L). La confirmation même de la présence de cette molécule était impossible à de très faibles concentrations (proches de 0,1 ng/L). En effet, les ratios des qualifiers liés à des fragments très à très peu spécifiques étaient tous biens supérieurs à leur intervalle de confiance de valeurs. Des interférences présentes dans la matrice Sambre (matrice de référence) perturbaient l’analyse d’EE2 et la méthode améliorée a montré son efficacité en offrant des ratios corrects pour la majorité des qualifiers. Cette capacité à identifier et à quantifier EE2 naturellement présent à des valeurs autour du dixième de ng/L a été confirmée par l’analyse de la Haine (Hensies).
La méthode finale présentée est capable de répondre aux récentes exigences de la Commission Européenne en termes de LOQ en ce qui concerne les trois estrogènes que cette dernière a ciblés (E1, E2 et EE2). La validation de cette méthode est l’ultime étape avant sa possible utilisation en routine.

Estrogens - LC-MS/MS - Water --- Ingénierie, informatique & technologie > Ingénierie chimique

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Thin-layer chromatography (TLC) is widely used particularly for pharmaceutical and food analysis. While there are a number of books on the qualitative identification of chemical substances by TLC, the unique focus here is on quantitative analysis. The authors describe all steps of the analytical procedure, beginning with the basics and equipment for quantitative TLC followed by sample pretreatment and sample application, development and staining, scanning, and finally statistical and chemometric data evaluation and validation. An important feature is the coverage of effect-directed biological detection methods. Chapters are organized in a modular fashion facilitating the easy location of information about individual procedural steps.

Pharmacology. Therapy --- Food science and technology --- farmacologie --- voedingsleer --- LC (liquid chromatography) --- chromatografie --- DLC (dunnelaagchromatografie)

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This book focuses on an “outside the box” notion by utilizing the powerful applications of next-generation sequencing (NGS) technologies in the interface of chemistry and biology. In personalized medicine, developing small molecules targeting a specific genomic sequence is an attractive goal. N-methylpyrrole (P)–N-methylimidazole (I) polyamides (PIPs) are a class of small molecule that can bind to the DNA minor groove. First, a cost-effective NGS (ion torrent platform)-based Bind-n-Seq was developed to identify the binding specificity of PIP conjugates in a randomized DNA library. Their biological influences rely primarily on selective DNA binding affinity, so it is important to analyze their genome-wide binding preferences. However, it is demanding to enrich specifically the small-molecule-bound DNA without chemical cross-linking or covalent binding in chromatinized genomes. Herein is described a method that was developed using high-throughput sequencing to map the differential binding sites and relative enriched regions of non-cross-linked SAHA-PIPs throughout the complex human genome. SAHA-PIPs binding motifs were identified and the genome-level mapping of SAHA-PIPs-enriched regions provided evidence for the differential activation of the gene network. A method using high-throughput sequencing to map the binding sites and relative enriched regions of alkylating PIP throughout the human genome was also developed. The genome-level mapping of alkylating the PIP-enriched region and the binding sites on the human genome identifies significant genomic targets of breast cancer. It is anticipated that this pioneering low-cost, high through-put investigation at the sequence-specific level will be helpful in understanding the binding specificity of various DNA-binding small molecules, which in turn will be beneficial for the development of small-molecule-based drugs targeting a genome-level sequence. .

Organic chemistry --- Molecular biology --- Biotechnology --- affiniteitschromatografie --- organische chemie --- biotechnologie --- gentherapie --- LC (liquid chromatography) --- moleculaire biologie

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Contracting out --- Letting of contracts --- Evaluation. --- Government policy --- LC Engineers, Inc.