TY - THES ID - 137743072 TI - Morfologische en moleculaire karaterisatie van zijwortelinitiatie in verschillende modelplanten AU - De Knijf, Alexa AU - Van Houdt, L. AU - Odisee PY - 2015 PB - Gent Odisee DB - UniCat UR - https://www.unicat.be/uniCat?func=search&query=sysid:137743072 AB - In het laboratorium van de ‘root development’-groep wordt onderzoek gedaan naar zijwortelinitiatie bij verschillende modelplanten. Zijwortels zijn namelijk van cruciaal belang voor de verankering en het opnemen van water en voedingsstoffen. Er wordt voor de studie van zijwortelinitiatie onder andere gebruik gemaakt van een lateraal wortel inducerend systeem (LRIS), dat het mogelijk maakt om zijwortels synchroon en overvloedig te induceren. Binnen dit project werd er onderzoek gedaan op Medicago truncatula, een modelplant voor leguminosen. Voor dit plantenspecies is een LRIS reeds geoptimaliseerd. Dit onderzoek had als doel de eerste celdelingen tijdens zijwortelvorming in de tijd te karakteriseren. Dit werd onderzocht door vibratoomsecties, microtoomsecties en qPCR. Karakterisatie van de eerste celdeling tijdens zijwortelinitiatie met behulp van microscopie leverde bij de microtoomsecties resultaten op. Eerste celdelingen van zijwortelontwikkeling zou starten rond 5 uur NAA behandeling. Via qPCR werd er vermoed dat de eerste celdeling na 4 uur NAA behandeling plaatsvindt.Een andere modelplant waar onderzoek op werd gedaan binnen dit project is Oryza sativa (rijst). Hiervoor werd een LRIS nog wat geoptimaliseerd door de concentratie van het auxine 1-naftaleenazijnzuur (NAA), die de beste zijwortelinductie gaf, te bepalen. Nadien werd ook bij rijst onderzocht wanneer de eerste celdeling plaatsvindt via microtoomsecties en qPCR. De qPCR en microtoomsecties geeft een vermoeden dat de eerste celdeling rond 6 uur NAA behandeling plaatsvindt. Ten slotte werd een LRIS in Arabidopsis thaliana (Arabidopsis of zandraket) gebruikt om de rol van vaatbundelweefselvorming gedurende zijwortelontwikkeling te bestuderen. De expressie van de genen die coderen voor transcriptiefactoren TMO5 en LHW en het enzym LOG4, allen betrokken bij de vorming van vaatbundelweefsel, werd bestudeerd tijdens zijwortelvorming. Hiervoor werd er gebruik gemaakt van fluorescente reporters in Arabidopsis, namelijk pTMO5-n3GFP, pLHW-n3GFP, pLOG4-n3GFP. Aangezien callusweefsel morfologische en moleculaire gelijkenissen vertoont met zijwortelvorming, werd ook hier aandacht aan besteed. De Arabidopsis reporterlijnen werden hiervoor aangebracht op callus inducerend medium en nadien op scheut inducerend medium. Aanwezigheid van het GFP wijst op expressie van de genen. LHW en LOG4 kwamen tot expressie tijdens laterale wortelvorming en callusvorming, TMO5 echter niet. Tijdens scheutvorming verzwakte het GFP signaal bij merkerlijnen pLOG4-n3GFP en pLHW-n3GFP en werd er een GFP signaal waarneembaar bij pTMO5-n3GFP. ER -