TY - THES ID - 135023821 TI - Gebruik van lentivirale vectoren voor detectie en onderdrukking van genexpressie in celcultuur PY - 2007 PB - Geel Katholieke Hogeschool Kempen. Campus HIK DB - UniCat UR - https://www.unicat.be/uniCat?func=search&query=sysid:135023821 AB - Lentivirale vectoren worden ontwikkeld om cellen stabiel te transduceren met erfelijk materiaal. In het Laboratorium voor Neurobiologie en Gentherapie van de K.U.Leuven worden HIV-afgeleide vectoren gebruikt om stabiele onderdrukking van genexpressie te bekomen en om specifieke doelwitcellen te merken en te kunnen opvolgen in de tijd. Een eerste doelstelling was het nagaan of met behulp van microRNA-gebaseerde hairpin structuren genexpressie onderdrukt kan worden. Hiervoor worden specifieke doelwitsequenties ingebracht in verschillende lentivirale vectoren. Deze vectoren worden dan gebruikt om cellen te transduceren. De onderdrukking van genexpressie kan aangetoond worden aan de hand van RT-Q-PCR (RNA-niveau) en/of western blotting (eiwit-niveau). Voor het Parkinson-gerelateerde eiwit Pink1 kan aangetoond worden dat een maximale onderdrukking van 70 % verkregen wordt op RNA niveau. Als tweede doelstelling wordt getracht cellen te merken met Flex Switch lentivirale vectoren. Flex Switch ER -