TY - BOOK ID - 127160940 TI - Etude de la fructose-2,6-bisphosphatase de cellules d'hépatome de rat AU - Verplancken, Sylvie AU - Hue, Louis AU - UCL.. MD/MED/BICL/HORM - Unité "hormones et métabolisme" PY - 1991 PB - Bruxelles: UCL., DB - UniCat KW - Rats KW - Fructose-2,6-Bisphosphatase KW - Carcinoma, Hepatocellular UR - https://www.unicat.be/uniCat?func=search&query=sysid:127160940 AB - Nous avons étudié le mécanisme d’action, les propriétés cinétiques et physiques de la FBPase-2 des cellules HTC. Il fallait la purifier partiellement afin de la débarrasser des contaminants gênants et notamment de la PFK-2 pour obtenir une enzyme monofonctionnelle.<BR>Dans un premier temps, la méthode de dosage de l’activité enzymatique de la FBPase-2 a été rendue la plus sensible possible pour permettre le dosage de l’activité enzymatique de la FBPase-2 d’HTC dans les premières étapes de la purification.<BR>Dans cette optique, deux méthodes de dosage ont été envisagées : le dosage par méthode fluorimétrique et le dosage par méthode radioactive.<BR>Le dosage estimé suffisamment sensible, la purification partielle a pu être entamée d’après le schéma suivant :<BR>- centrifugation de l’homogénat cellulaire<BR>- précipitation au polyéthylène glycol (PEG)<BR>- chromatographie sur l’échangeur d’ions Mono Q. L’enzyme est éluée avec un gradient de chlorure de potassium. ER -