TY - BOOK ID - 127060120 TI - Développement et validation d'une méthode de dosage de la témocilline par chromatographie liquide haute performance couplée à un spectromètre de masse en vue de son utilisation pour le suivi thérapeutique et pharmacologique AU - Ngougni Pokem, Perrin AU - Van Bambeke, Françoise AU - UCL.. FASB - Faculté de pharmacie et des sciences biomédicales PY - 2015 PB - Bruxelles: UCL. Faculté de pharmacie et des sciences biomédicales, DB - UniCat KW - Urologic Diseases KW - Chromatography, Liquid KW - Satellite Imagery UR - https://www.unicat.be/uniCat?func=search&query=sysid:127060120 AB - The aim of this study was to develop and validate an HPLC-MS/MS assay to determine total and unbound concentrations of temocillin in biological samples. The validated method was used to determine temocillin levels in serum and tissue samples from treated patients.Design and mcthods: Methanolic protein precipitation and ultrafiltration were used for total and unbound concentration extraction. respectively. Extract was injected into a LC-MS/MS system for the quantification of the antibiotic. using ticarcillin as an internal standard.Results: Temocillin total and unbound concentration quantification assays Vere linear over concentrations ranging from 1 to 500mg/L and from 0.5 to 300mg/L respectively. Both assays presented acceptable intra and inter-assay precision and accuracy < 13.9%. Limits of quantification and detection were of l and 0.1Omg/L and 0.5 and 0.05mg/ L for total and unbound concentration respectively. Total temocillin concentration recovery ranged from 85.80 to 99.40%. No memory effect had been observed and temocillin ion suppression effect was <36.2 % in both assays. This method allowed us to determine free and total concentrations in scrum samples from an hemodialysis patient with results similar to those obtained with a previously validated HPLC-UV method for total concentration. lt was then applied to serum and pancreatic samples from an intensive care patient in whom we observed a high free fraction (related to hypoalbuminemia) and a tissular concentration higher than scrum levels.Conclusion: The method described is fast, sensitive and selective. with no interferences. This method may be used for bot h pharmacokinetic studies and therapeutic drug monitor ng purposes. Le but de cette étude était de développer et de valider une méthode analytique (HPLC MS/MS) pour déterminer les concentrations totales et libres de témocilline dans des échantillons biologiques . La méthode validée a été utilisée pour doser des échantillons sériques et tissulaires provenant de patients traités avec la témocilline.Méthodes: La précipitation des protéines sériques avec du méthanol et ultrafiltration ont été utilisés pour l'extraction de la fraction totale et libre de la témocilline, respectivement. L'extrait a été injecté dans un système LC-MS / MS pour la quantification de l 'antibiotique, en utilisant la ticarcilline comme standard interne.Résultats: Le dosage de la concentration de la fraction totale et libre de la témocilline était linéaire dans l'intervalle allant de 1 à 500 mg/L et de 0,5 à 300 mg/L, respectivement. L'exactitude et la précision inter et intra-jour étaient <13,9%. Les limites de quantification et de détection étaient de 1 et de 0,10 mg/L, et, de 0,5 et de 0,05 mg/L pour les concentrations des fractions totale et libre respectivement. Le rendement d'extraction de la témocilline était compris entre 85,80 et 99,40%. Aucun effet mémoire n'avait été observé et le phénomène de suppression d'ions était <36,2% dans les deux essais. La méthode a permis de doser la fraction libre et totale de témocilline dans des échantillons sériques d'un patient en hémodialyse , avec des résultats équivalents pour la fraction totale à ceux obtenus par une méthode HPLC-UV précédemment validée. Elle a ensuite été appliquée aux échantillons sériques et pancréatiques d'une patiente de soins intensifs chez qui nous avons observé une fraction libre élevée en relation avec une hypoalbuminémie et une concentration tissulaire supérieure à la concentration sérique.Conclusion: La méthode validée est spécifique, rapide, et sans interférences. Cette méthode peut être utilisée pour des études de pharmacocinétique pour suivi thérapeutique et pharmacologique de la témocilline. ER -