TY - BOOK ID - 126934768 TI - Fractionnement du sérum de patients allergiques après immunothérapie pour l'étude du rôle des anticoprs IgA anti-allergènes AU - Gabriels, Julie AU - Delmée, Michel AU - Pilette, Charles AU - UCL.. MD/MED/MIGE/MBLG - Unité de microbiologie PY - 2006 PB - Bruxelles: UCL, DB - UniCat KW - Immunotherapy KW - Hypersensitivity KW - Immunoglobulin A KW - Allergens KW - Anti-Bacterial Agents UR - https://www.unicat.be/uniCat?func=search&query=sysid:126934768 AB - Allergen-specific immunotherapy reorientes cellular and humoral responses in allergic patients, by inducing specific tolerance. It was previously shown an important increase in serum IgS antibodies (mainly IgG4) following specific immunotherapy, with a blocking effect on various steps of the allergic reaction (antigenic presentation, basophil degranulation). An increase in specific IgA was recently observed in our laboratory, in the serum of patients treated by immunotherapy. In order to study the role of IgA antibodies in the development of tolerance, we believe interesting to purify these antibodies induced in the serum of patients treated by immunotherapy (for Phleum Pratense, Phl p). More specifically, effects of these IgA antibodies on the induction of interleukin-10 (IL-10) in the monocytes and on the inhibition od degranulation of the basophils will be assessed. Patients’ sera were successively purified by affinity chromatography, pooled and concentrated by ultrafiltration immunoglobulins of the IgG (protein G column), IgA1 (column of Jacaline) and IgA2 (anti-IgA column) subclasses. We then showed ELISA that the fractions obtained had been enriched in IgG, IgA1 and IgA2, and contained Phl p allergen-specific antibodies. Using a Phl p immunoadsorbant we isolated by affinity chromatography specific IgG antibodies. The purification of IgA antibodies using the same technique should allow their functional study. L’immunothérapie allergénique réoriente les réponses immunitaires cellulaires et humorales du patient allergique, en induisant une tolérance spécifique. Il a été démontré précédemment, en réponse à l’immunothérapie spécifiques, une augmentation importante des anticorps IgG sériques (principalement IgG4) exerçant un effet bloquant dur différentes étapes de la réaction allergique (présentation antigénique, dégranulation des basophiles). Parallèlement, une augmentation de IgA spécifiques a été récemment observée par notre laboratoire dans le sérum de patients traités au long cours par immunothérapie. Il nous a dès lors semblé intéressant de purifier les anticorps des différents sous-classes d’immunoglobulines (Igs) présentes dans le sérum de patients allergiques (rhinite avec/sans asthme) traités par immunothérapie (au pollen de la Phléole des Prés, Phl p) afin d’étudier le rôle de ces anticorps dans le développement d’une tolérance vis-à-vis de l’allergène. Plus spécifiquement, un effet de ces anticorps IgA est recherché sur l’induction d’interleukine-10 (IL-10) dans les monocytes et sur l’inhibition de la dégranulation des basophiles. A partir de séra de patients nous avons successivement purifié par chromatographie d’affinité, poolé et concentré par ultrafiltration les Igs de type IgG (colonne de protéine G), IgA1 (colonne de jacaline) et IgA2 (colonne anti-IgA). Nous avons alors démontré par ELISA que les différents fractions obtenues avaient bien été ernichies en IgG, IgA1 et IgA2, et contenaient des anticorps spécifiques de l’allergène Phl p. Enfin, nous sommes parvenus à isoler par chromatographie d’affinité (immunoadsorbant Phl p) les IgG spécifiques et probablement, après différentes modifications méthodologiques, les IgA spécifiques de Phl p. ER -