TY - BOOK ID - 126927055 TI - Identification de l'enzyme qui catalyse une réaction d'échange entre l'adénosine et l'AMP dans le foie de rat AU - Mimouni, Mohsine AU - Bontemps, Françoise AU - Van den Berghe, Georges AU - UCL.. MD/BICL/BCHM - Laboratoire de chimie physiologique PY - 1991 PB - Bruxelles: UCL, DB - UniCat KW - Adenosine KW - Adenosine Monophosphate KW - Rats UR - https://www.unicat.be/uniCat?func=search&query=sysid:126927055 AB - Bontemps et al (1991) avaient découvert que des hépatocytes isolés de rat en anoxie incorporaient encore aisément de l’adénosine radioactive dans l’AMP, alors que l’ATP nécessaire pour la phosphorylation du nucléoside avait quasiment complètement disparu. Cette utilisation d’adénosine radioactive ne correspondait cependant ni à une disparition réelle de l’adénosine, ni à une synthèse nette de nucléotide adényliques. Par la suite, ils purent mettre en évidence que la fraction cytosolique du foie de rat peut catalyser une réaction d’échange entre l’adénosine et l’AMP, de sorte que l’adénosine peut effectivement être phosphorylée en l’absence d’ATP. <BR> Le but de notre travail était d’identifier l’enzyme responsable de cette réaction. Nous avons envisagé qu’elle pourrait être catalysée par l’adénosine kinase elle-même ou par la 5’-nucléotidase cytosolique, pour laquelle un échange IMP-inosine avait déjà été décrit. Nos résultats montrent que la première hypothèse était la bonne. L’activité d’échange adénosine-AMP est en effet inhibée par plusieurs inhibiteurs de l’adénosine kinase et co-élue avec cette enzyme dans plusieurs systèmes de chromatographie, tels la DEAE-Sepharose, le Sepharose G-100 et l’AMP-Sepharose. Son poids moléculaire correspond aussi à celui de l’adénosine kinases. D’un point de vue cinétique, nous montrons que la réaction d’échange nécessite la présence de Mg++ et que ses Km pour l’adénosine et l’AMP sont tels que cette réaction peut effectivement se passer dans la cellule intacte. Nous avons par ailleurs remarqué que cette réaction est fortement stimulée par le 2,3-biphosphoglycérate, un stimulateur que l’on croyait spécifique de la 5’-nucléotidase cytosolique. L’ensemble de nos résultats indique que le mécanisme de la réaction de l’adénosine kinase de foie de rat est un mécanisme « BiBi » ping pong ER -